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2x 長(zhǎng)片段PCR 擴(kuò)增 預(yù)混液（ long fragment PCR Master Mix）說(shuō)明書(shū)

更新時(shí)間：2023-10-24      點(diǎn)擊次數(shù)：648

1.png


使用方法

  1. 充分溶解并混勻PCR反應(yīng)所需的各種溶液。將2x 長(zhǎng)片段PCR 擴(kuò)增 預(yù)混液（ long fragment PCR Master Mix）置于冰浴上或冰盒內(nèi)。參考下表在冰上設(shè)置PCR反應(yīng)：

Component20uL RXN25uL RXN50uL RXNFinal Concentration
2x 長(zhǎng)片段PCR 擴(kuò)增 預(yù)混液10uL12.5uL25uL1 ×
10uM Forward Primer0.4uL0.5uL1.0uL0.2uM
10uM Reverse Primer0.4uL0.5uL1.0uL0.2uM
Template DNAvariablevariablevariablevariable
Nuclease-Free Waterto 20uLto 25uLto 50uL
2 . 不同模板最佳反應(yīng)濃度有所不同，反應(yīng)體系推薦模板使用量可參見(jiàn)下表。
Template DNA20uLRXN25uL RXN50uL RXN
Genomic DNA4ng-0.4ug5ng-0.5ug10ng-1ug
Plasmid or Vrial4pg-4ng5pg-5ng10pg-10ng
cDNA4pg-0.4ug5pg-0.5ug10pg-1ug
3. 用移液器輕輕吹打混勻或輕微Vortex混勻，室溫離心數(shù)秒，使液體積聚于管底。
反應(yīng)程序
1 .退火溫度應(yīng)根據(jù)引物Tm值進(jìn)行調(diào)整(50-72℃)。
2. 延伸時(shí)間需根據(jù)擴(kuò)增片段的長(zhǎng)度和復(fù)雜性進(jìn)行調(diào)整。
3. 各設(shè)置好的PCR反應(yīng)管置于PCR儀上，開(kāi)始PCR反應(yīng)。
STEPTEMPTIME
Initial Denaturation98°C30 sec
25–35 Cycles98°C10 sec

50–72 °C15 sec

72°C15-30 sec/kb
Final Extension72°C5 min
Hold4–10 °C∞
運(yùn)輸及保存方法
-20℃ 保存 一年 干冰運(yùn)輸


貨號(hào)品名規(guī)格品牌
78DC10152-1ml2x 長(zhǎng)片段PCR 擴(kuò)增 預(yù)混液（long fragment PCR Master Mix）1mlBIOHUB
78DC10152-5ml2x 長(zhǎng)片段PCR 擴(kuò)增 預(yù)混液（long fragment PCR Master Mix）5mlBIOHUB
78DC10152-3*5ml2x 長(zhǎng)片段PCR 擴(kuò)增 預(yù)混液（long fragment PCR Master Mix）3*5mlBIOHUB







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